时尚秀场

文字大小

其特点是对淀的抑慢性高血糖

来源:证券热点外汇站时间:2025-07-15 19:03:12

导读

其特点是对淀的抑慢性高血糖

糖尿病是栀黄制动一种多病因综合作用导致的代谢性疾病,其特点是对淀的抑慢性高血糖,伴随因胰岛素分泌不足和(或)作用障碍引起的粉消糖、脂肪、化酶互作蛋白质代谢紊乱。力学世界卫生组织将糖尿病主要分为两类:Ⅰ型糖尿病,及相究主要原因是用研胰腺β-细胞遭到破坏,导致血浆胰岛素水平低下;Ⅱ型糖尿病,栀黄制动是对淀的抑一种非感染性慢性代谢综合征,其特点是粉消胰岛素分泌受损和靶组织对胰岛素作用的抵抗而导致的高血糖。据统计,化酶互作Ⅱ型糖尿病是力学世界范围内最常见的糖尿病,占所有糖尿病患者的及相究90%以上,被认为是用研主要的公共卫生问题。预计2030年糖尿病将成为人类第七大致死因素,栀黄制动被公认为“无声杀手”。预计到2035年,受影响的人数将增加到5.92亿。世界卫生组织最近公布的统计数据显示,全世界大约有15亿成年人超重和肥胖,这使他们具有患糖尿病的潜在风险。

在食物消化过程中,淀粉被α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶共同作用水解成单糖,抑制这些酶的活性可显著降低餐后血糖升高。抑制淀粉水解和葡萄糖的吸收是预防Ⅱ型糖尿病的有效途径。近些年来,膳食活性成分在预防慢性疾病中的作用受到广泛关注。据统计,目前有800余种植物提取物可能对糖尿病的治疗起积极的作用。关于植物提取物作为淀粉消化酶抑制剂的研究成为热点。栀子是我国治疗糖尿病传统药物,是一种含有多种有效活性成分的药食两用资源,具有抗炎、抗氧化、保护神经等多种药理作用。肖小华等报道栀子黄含量为1.67g/mg时能显著降低不同糖负荷的小鼠血糖,后续研究发现栀子提取物对α-葡萄糖苷酶产生抑制作用的有效部分可能是环烯醚萜和栀子黄色素类。Zhou等通过研究栀子对治疗Ⅱ型糖尿病的动物实验粪便组学从侧面证实了栀子黄的降糖效果。李春英等报道栀子黄抑制α-葡萄糖苷酶活性,然而,具体作用机制不详。本研究探讨栀子黄对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的影响及其作用动力学,通过光谱特征分析两种淀粉消化酶结构变化,揭示栀子黄对餐后血糖升高的抑制作用机制,以期为糖尿病患者功能产品的开发提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

栀子黄(色价500),河南中大恒源生物科技有限公司;小麦淀粉(含水量12.89%),泰州市好食惠调味品有限公司;α-淀粉酶(50U/mg),美国Sigma公司;α-葡萄糖苷酶(7000000U/mL),上海源叶生物科技有限公司;4-硝基苯基-α-D-吡喃葡糖苷(PNPG),麦克林生化科技有限公司;3,5-二硝基水杨酸,国药集团化学试剂有限公司。其余试剂均为分析纯,天津科密欧化学试剂有限公司。

1.2 仪器与设备

UV-1600B紫外可见分光光度计,上海美谱达仪器有限公司;FA1004电子分析天平,上海上平仪器公司;MultiskanFC96孔酶标仪,赛默飞世尔仪器有限公司;G9800A荧光分光光度计,安捷伦科技有限公司;MVS-1旋涡混合器,北京金北德工贸有限公司;SHZ-82数显水浴恒温振荡器,金坛华峰仪器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 栀子黄对α-淀粉酶抑制动力学研究

使用米氏方程(Michaelis-Menton)和LineweaverBurk方程确定栀子黄对α-淀粉酶的抑制方式。以小麦淀粉溶液作底物磷酸盐缓冲液溶解后在80℃的水浴锅中糊化30min。淀粉质量分数为0.5%,1.0%,1.5%,2.0%。栀子黄溶液质量浓度定为0.5,0.7mg/mL。向具塞试管中先加入不同浓度栀子黄溶液250μL,再添加250μLα-淀粉酶溶解液37℃振荡10min,再加入500μL不同浓度的底物溶液,每隔5min取出相对应的试管并加入2.0mLDNS显色剂沸水中加热5min后冷却至室温,定容至25mL,540nm处测量其吸光度。

1.3.2 栀子黄对α-葡萄糖苷酶抑制动力学研究

α-葡萄糖苷酶与α-淀粉酶的试验方法大致相同。栀子黄溶液浓度仍然为0.5,0.7mg/mL,试验中需要将作为底物的PNPG溶液的浓度范围设定为0.5~5.0mmol/L。向96孔酶标板中先加入80μL磷酸盐缓冲溶液按设定加入20μL不同浓度的栀子黄溶液和60U/mL的α-葡萄糖苷酶溶液,37℃气浴振荡10min后加入20μLPNPG底物溶液,每隔5min取出酶标板并加入100μL的0.2mol/L的碳酸钠溶液终止反应,用96孔酶标仪在405nm处测定吸光度。具体的方程计算情况与上述的α-淀粉酶的过程相一致。

1.3.3 α-淀粉酶荧光光谱测定

探究不同浓度栀子黄对α-淀粉酶的荧光猝灭光谱。在磷酸盐缓冲液中配置质量浓度0.025,0.1,0.3,0.5,0.7,1mg/mL的栀子黄;将α-淀粉酶(300U/mL)溶解到pH6.8的磷酸盐缓冲液中,在3mL的α-淀粉酶的溶液中加入0.2mL不同浓度的栀子黄漩涡振荡2min定容至10mL。将混合液分别在30℃和37℃的水浴条件下恒温振荡30min。以等量的栀子黄溶液为空白参比,激发波长278nm,发射波长290nm,狭缝宽度5nm,在290~500nm波长范围内进行荧光发射光谱扫描。

1.3.4 α-葡萄糖苷酶荧光光谱分析

α-葡萄糖苷酶荧光光谱分析与α-淀粉酶类似,其中α-葡萄糖苷酶的酶活力大小为180U/mL激发波长278nm,发射波长290nm,狭缝宽度5nm,在290~450nm波长范围下进行荧光发射光谱扫描。其中的对照试验与上述α-淀粉酶的方法与操作相同。

同步荧光光谱试验与1.3.3节过程大致相同,在上述荧光猝灭试验基础上,将参数改变为:α-淀粉酶,α-葡萄糖苷酶均在波长200~400nm范围内,通过设定激发波长间隔和发射波长间隔在△λ=15~60nm的设定下进行荧光光谱扫描。
酶的抑制动力学可以通过以下方程表示:

Michaelis-Menton方程:

不同I下的双倒数直线得出斜率Slope。利用I和Slope再次作图得出Kic。方程如下:

将斜率(Slope)或截距(Y-intercept)与I的二次重绘图并进行线性拟合。式(1)、(2)、(3)、(4)中:V—初始反应速度,mg/mL/min;S—底物质量浓度,mg/mL;Vmax—最大初始反应速度,mg/mL/min;I—抑制剂质量浓度,mg/mL;α—表观系数;Km—米氏常数;Kic—竞争性抑制常数;Kiu—非竞争性抑制常数。

荧光猝灭通过Stern-Volmer方程描述:

式(5)中:F0和F—分别为不存在和存在猝灭剂时荧光物质的荧光强度;Ksv和Kq—分别为Stern-Volmer猝灭常数和受扩散过程控制的双分子荧光猝灭速率常数;[Q]—猝灭剂质量浓度,mg/mL;τ0—荧光分子平均寿命(α-淀粉酶的τ0为2.97ns,α-葡萄糖苷酶的τ0为10-8s)。

相关链接:α-葡萄糖苷酶α-淀粉酶栀子黄5-二硝基水杨酸

 


声明:本文所用图片、文字来源《中国食品学报》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系

大连医科大学附属第一医院
首都医科大学附属北京朝阳医院
四川大学华西医院
重庆医科大学附属第一医院
北京医院
中国医学科学院阜外医院
吉林大学第二医院
河南科技大学第一附属医院
山西医科大学第一医院
中山大学附属第一医院
承德医学院附属医院
山东省立医院
浙江大学医学院附属邵逸夫医院
天津医科大学总医院
海军军医大学附属长海医院
温州医学院附属第一医院
深圳市人民医院
空军军医大学西京医院
蚌埠医学院第一附属医院
深圳市第六人民医院(南山医院)
上海交通大学医学院附属瑞金医院
青岛大学附属医院
北部战区总医院
济宁医学院附属医院
福建医科大学附属第一医院
烟台市烟台山医院
哈尔滨医科大学附属第二医院
昆明医科大学第一附属医院
山东淄博市第一医院
南京鼓楼医院
东莞市人民医院
新疆医科大学第一附属医院
北京京煤集团总医院
首都医科大学附属北京潞河医院
新疆维吾尔自治区人民医院
中南大学湘雅医院
广州医科大学附属第一医院
北京协和医院
江阴市人民医院
河北医科大学第二医院
中国人民解放军总医院第六医学中心
沈阳医学院附属中心医院(奉天医院)
天津市宁河区医院
四川省人民医院
邯郸市第一医院
潍坊呼吸病医院
云南省第一人民医院
山西省人民医院
内蒙古医学院第三附属医院
河北衡水哈励逊国际和平医院
海南省人民医院
青海省人民医院
贵州省人民医院
华北理工大学附属医院
福建省泉州市第一医院
锦州医科大学附属第一医院
首都医科大学附属复兴医院
淄博市立医院
山西省太原市中心医院
上海市肺科医院
新疆医科大学第三附属医院
山西医学科学院山西大医院
天津市海河医院
战略支援部队特色医学中心
河北医科大学第三医院
北京积水潭医院
无锡市人民医院
新疆维吾尔自治区中医医院
安徽省胸科医院
空军军医大学唐都医院
广东省人民医院 
复旦大学附属华山医院
首都医科大学附属北京安贞医院
中国人民解放军总医院第一医学中心
宁夏医科大学总医院
河南省焦作市第二人民医院
首都医科大学附属北京同仁医院
南方医科大学南方医院
南昌大学第二附属医院
北京市大兴区人民医院
上海交通大学医学院附属新华医院
内蒙古自治区人民医院
南昌大学第一附属医院
中国医科大学附属盛京医院
西安交通大学第一附属医院
河北医科大学第一医院
广西壮族自治区人民医院
北京市顺义区医院
复旦大学附属中山医院
中山大学附属第三医院
粤北人民医院
首都医科大学附属北京世纪坛医院
中国科学院大学附属北京怀柔医院
首都医科大学附属北京儿童医院
天津市第一中心医院
华中科技大学同济医学院附属同济医院
兰州大学第二附属医院
西藏自治区第二人民医院
唐山工人医院
中日友好医院

上一篇: 超大年夜号扬声器太抢眼,金坐新机上市,号称采与无告白杂净体系

下一篇: 西安那里有蔷薇花 蔷薇花那里最皆雅