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为了配合新版标准的执行

环己基氨基磺酸钠(又名甜蜜素)、法测乙酰磺胺酸钾(又名安赛蜜)和邻苯甲酰磺酰亚胺钠(又名糖精钠)是定饮常用的人工合成甜味剂,用于增加甜度,料中改善食品口感。甜蜜受利益驱使,素糖赛蜜市场上存在滥用和超范围使用的精钠情况。为了避免添加剂过量摄入对人体的和安潜在伤害,国家对不同类型食品中添加剂使用做了严格的法测规定。

《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》GB2760-2014与GB2760-2011相比,定饮面包、料中糕点、甜蜜饼干、素糖赛蜜复合调味料、精钠饮料类和配制酒中禁止使用邻苯甲酰磺酰亚胺钠,和安环己基氨基磺酸钠扩大用量和使用范围,法测乙酰磺胺酸钾用量和使用范围未发生变化,为了配合新版标准的执行,建立快速、准确、检出限低的检测方法是非常必要的。目前常用的检测方法有分光光度法、高效液相色谱法、超高效液相质谱法(UPLC/MS/MS)和离子阱飞行时间串联质谱法(LCMS-IT-TOF)等。本文通过优化样品前处理方法,应用超高效液相质谱法的高通量特点,建立UPLC/MS/MS法测定饮料中甜蜜素、糖精钠和安赛蜜的检测方法。

一、试验部分

1、仪器与试剂

超高效液相色谱-串联质谱仪(WatersXevoTQD):电喷雾(ESI)接口、MSD检测器、Masslynx4.1软件;冷冻离心机(德国Sigma公司);超声提取仪(ZEALWAYS22H);电子天平(METTLERTOLEDOXS105DU);电子天平(METTLERTOLEDOAR2130);电子天平(上海友声衡器有限公司BS-600L);旋涡混合器(VORETEX-5kylin-Bell);微孔滤膜:0.22μm;甲醇(德国CNW质谱纯);氨水(国药集团,分析纯);PSA(德国CNW,分析纯);沉淀剂:亚铁氰化钾溶液(43.4g/L);乙酸锌溶液(43.9g/L);标准品:环己基氨基磺酸钠(德国Dr.EhrenstorferGmbH);乙酰磺胺酸钾(德国Dr.EhrenstorferGmbH);糖精钠标准溶液(中国计量科学院)。

2、仪器参考条件

(1)超高压液相色谱条件

WatersAcquityUPLCTMBEHC18柱(100mm×2.1mm,1.7μm);进样量5μL;柱温30℃。梯度洗脱程序见表1。

(2)质谱条件

负离子扫描(ESI-);多反应离子监测(multiplereactionionmonitoring,MRM);毛细管电压2.8kV;脱溶剂气温度为400℃;锥孔尾吹气为高纯氮气,流速为50L/h;脱溶剂气为高纯氮气,流速为800L/h。定性、定量离子对及锥孔电压、碰撞电压见表2。

3、试验方法

(1)试样制备

①可乐型饮料

a)脱气:取适量样品于烧杯中,用超声提取仪在40℃下超声5min;

b)净化:准确取2~5g(精确至0.0001g)样品,加水定容至10mL,摇匀,涡旋混匀,5000r/min离心5min,取上液经0.22μm微孔滤膜过滤,用于检测糖精钠与安赛蜜;准确取2~5g(精确至0.0001g)样品,加水定容至10mL,摇匀,涡旋混匀,加入0.5gPSA,5000r/min离心5min,取上清液经0.22μm微孔滤膜过滤,用于检测甜蜜素。

②不含乳的饮料

准确取2~5g(精确至0.0001g)样品,准确取2~5g(精确至0.0001g)样品,加水定容至10mL,摇匀,涡旋混匀,5000r/min离心5min,取上清液经0.22μm微孔滤膜过滤,用于检测糖精钠与安赛蜜;准确取2~5g(精确至0.0001g)样品,加水定容至10mL,摇匀,涡旋混匀,加入0.5gPSA,5000r/min离心5min,取上清液经0.22μm微孔滤膜过滤,用于检测甜蜜素。

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